पिपेट का उपयोग कैसे करें

पिपेट ऐसे उपकरण हैं जिनका उपयोग आमतौर पर जैविक और रासायनिक प्रयोगशालाओं में तरल पदार्थों की थोड़ी मात्रा को हटाने के लिए किया जाता है। फायदे संचालित करने में आसान और उच्च सटीकता हैं। इसके साथ, प्रयोगशाला पिपेटिंग अब विश्लेषण त्रुटियों का मुख्य कारण नहीं है।

पिपेट के बारे में आपको जो बातें जाननी हैं, उनके लिए नीचे देखें!

1. पिपेट पिपेट का उन्नत संस्करण है

सौ साल से भी पहले, प्रयोगशाला में अभिजात वर्ग ने तरल पदार्थों को स्थानांतरित करने के लिए पिपेट का उपयोग करना शुरू कर दिया था। तथाकथित पिपेट एक से N स्केल वाली खोखली कांच की ट्यूब होती है। ग्लास ट्यूब को तरल में डालें और ट्यूब के दूसरे छोर पर मुंह का उपयोग करें (शुरुआत में, हमारे कुलीन लोग केवल अपने कीमती मुंह का उपयोग काम को सुखाने के लिए कर सकते हैं) या तरल को ट्यूब में खींचने के लिए कान को धो लें, जबकि ऊपर पैमाना हमें बताता है कि अंदर कितना तरल है। हमें जितनी मात्रा चाहिए उसे भरने के बाद, अपने अंगूठे से एस्पिरेशन के सिरे को प्लग करें, फिर ट्यूब को दूसरे कंटेनर में रखें और ट्यूब में मौजूद तरल को दूसरे कंटेनर में प्रवाहित होने दें। इस तरह हम द्रव का स्थानांतरण कर सकेंगे!

हालाँकि, समाज की प्रगति के साथ, अभिजात वर्ग ने पाया कि पाइप का उपयोग करना आसान नहीं था, थका हुआ और धीमा था, और यह बहुत साफ नहीं था। तो आलसी विचार मस्तिष्क में जमा होते हैं, जमा होते हैं, और फिर फूट पड़ते हैं - तो पिपेट का जन्म होता है!

अर्थात पिपेट और पिपेट का प्रभाव एक जैसा होता है, अंतर केवल इतना है:

सबसे पहले, सटीकता और भी अधिक है (पुराने पिपेट की तुलना में नए पिपेट में कुछ अभिजात वर्ग की सटीकता के आधार पर);

दूसरा, उच्च दक्षता (संचालित करने में आसान);

तीसरा, अधिक जटिल संरचना (पिपेट एक रूट पाइप है, जबकि पिपेट दर्जनों भागों से बना है);

चौथा, फ़ंक्शन अधिक शक्तिशाली है (पिपेटिंग के अलावा, कई पिपेट में कई कार्य होते हैं);

पांचवां, और सबसे महत्वपूर्ण बात, कीमत अधिक है (उच्च प्रौद्योगिकी की कीमत निश्चित रूप से अधिक होगी।)

2. पिपेट का कार्य सिद्धांत

तथाकथित सटीक उपकरणों के लिए, अधिकांश समय, हमें इसके गूढ़ सिद्धांतों को गंभीरता से पेश करना होगा, लेकिन पिपेट का सिद्धांत बहुत सरल है - पिस्टन को तरल को डिस्चार्ज करने या चूसने के लिए स्प्रिंग के दूरबीन बल द्वारा ऊपर और नीचे ले जाया जाता है .

सामान्यतया, पिपेट को दो प्रकारों में विभाजित किया जाता है, एक है वायु विस्थापन प्रकार; दूसरा बाहरी पिस्टन प्रकार है, जिसे अक्सर एक विशेष पिपेट के रूप में उपयोग किया जाता है, और अनुप्रयोग सीमा अपेक्षाकृत संकीर्ण होती है।

इस प्रकार के पिपेट का उपयोग किया जा सकता है। उच्च चिपचिपाहट वाले नमूने निकालने के लिए उपयोग किया जाता है।
तथाकथित वायु विस्थापन प्रकार पिपेट के निचले सिरे के अंदर हवा को दबाने के लिए पिस्टन को दबाना है, और फिर जब पिस्टन ऊपर जाता है, तो पिपेट के निचले सिरे के अंदर हवा का दबाव बाहरी वायु दबाव से छोटा होता है, ताकि बाहरी हवा के दबाव के प्रभाव में आप तरल पदार्थ सोख सकें। संक्षेप में, हवा बाहर चली जाती है और तरल अंदर आ जाता है!

तथाकथित बाहरी पिस्टन प्रकार वास्तव में सिरिंज के समान ही है। जब आप सिरिंज की कार्य प्रक्रिया देखते हैं, तो आप संभवतः बाहरी पिस्टन के सिद्धांत को समझ सकते हैं।

पिपेट के कार्य सिद्धांत में रुचि रखने वालों के लिए, कृपया लेबे के पिछले लेख को देखें, जिसे विशेष रूप से "पिपेट का चयन और उपयोग - पिपेट की संरचना, सिद्धांत और पिपेटिंग मोड" में पेश किया गया है। .

3. पिपेट रेंज समायोजन

मूल पिपेट रेंज को समायोजित करने में असमर्थ था, जो आज बाजार में निश्चित-रेंज पिपेट है।

उदाहरण के लिए, यदि आप 200ul पिपेट खरीदते हैं, तो हर बार स्थानांतरित तरल की मात्रा केवल 200ul हो सकती है। समय के साथ, इस प्रकार के पिपेट को आधुनिक शोधकर्ताओं की जरूरतों को पूरा करना मुश्किल हो गया है। हालाँकि अधिकांश ब्रांड निश्चित-रेंज पिपेट का भी उत्पादन करते हैं, लेकिन उपयोगकर्ताओं की सापेक्ष संख्या कम हो गई है।
मांग के आधार पर एडजस्टेबल रेंज वाला पिपेट पेश किया गया, लेकिन उस समय रेंज कम उपलब्ध थी। उदाहरण के साथ जारी रखें: यदि आप 200ul पिपेट खरीदते हैं, तो इसमें 4 गियर होते हैं, 200ul, 150ul, 100ul, 50ul। दूसरे शब्दों में, इस पिपेट के साथ, आप जिस तरल पदार्थ को स्थानांतरित कर सकते हैं उसकी मात्रा को इन चार गियर के बीच चुना जा सकता है, जो मूल निश्चित-रेंज पिपेट की तुलना में बहुत आसान है। हालाँकि, इस पिपेट का रेंज चयन भी सीमित है, और यह उपयोगकर्ता की आवश्यकताओं को पूरी तरह से पूरा करने में भी असमर्थ है। इसलिए, हम इस पिपेट को निश्चित-श्रेणी पिपेट के रूप में वर्गीकृत करते हैं।

आज बाजार में मुख्यधारा के पिपेट समायोज्य रेंज के पिपेट हैं जिन्हें एक निश्चित सीमा के भीतर स्वतंत्र रूप से समायोजित किया जा सकता है। सामान्य तौर पर, पिपेट की सीमा को लेबल की गई अधिकतम सीमा के 10% से 100% तक समायोजित किया जाता है। या एक उदाहरण के रूप में 200ul पिपेट लें: यदि आप 200ul समायोज्य रेंज पिपेट खरीदते हैं, तो आप 20-200 ul की वॉल्यूम रेंज में तरल को स्वतंत्र रूप से स्थानांतरित कर सकते हैं। यह हमारे उपयोगकर्ताओं को बहुत सुविधा प्रदान करता है, लेकिन यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि किसी विशेष पिपेट के लिए, स्थानांतरित तरल की मात्रा जितनी कम होगी, सामान्य सटीकता उतनी ही कम होगी।

4. पिपेट के चैनलों की संख्या

पहले पिपेट से लेकर पिपेट बाजार की वर्तमान मुख्यधारा तक, ऐसे पिपेट हैं जो एक समय में केवल एक तरल नमूना स्थानांतरित कर सकते हैं, जिसे हम एकल-चैनल पिपेट कहते हैं। लेकिन जीवन विज्ञान के तेजी से विकास के साथ, कई बार एकल-चैनल पिपेट का मतलब अक्षमता होता है।

उदाहरण के लिए, यदि आप 96-वेल प्लेट भरना चाहते हैं (96-वेल प्लेट एक 96-वेल प्लास्टिक प्लेट है जिसमें एक निश्चित मात्रा में तरल होता है), तो आपको एकल-चैनल पिपेट के साथ 96 चालें दोहरानी होंगी। तरल संचालन, यह कोई बुरी बात नहीं है, मेरा मानना ​​है कि जिन कई लोगों को यह अनुभव हुआ है, वे गहराई से प्रभावित होंगे। यदि आप लगातार कई 96 प्लेटें भरना चाहते हैं, तो एक शब्द - थक गया!

तो, कई पिपेट हैं, जो एक पिपेटिंग ऑपरेशन में कई तरल नमूनों को स्थानांतरित कर सकते हैं। इस पिपेट को आमतौर पर "रो गन" कहा जाता है। अब, बाजार में कई प्रकार के मल्टी-चैनल पिपेट हैं, जैसे 6, 8, 12, 16, 24, या यहां तक ​​कि 36, 48, 64, और 96 (आपूर्तिकर्ता 96 चालों को कॉल करता है)। तरल कार्य केंद्र).

उदाहरण के लिए, एक 8-चैनल पिपेट एक समय में 8 तरल नमूने स्थानांतरित कर सकता है, इत्यादि। बेशक, बाजार में सबसे अधिक उपयोग 8-चैनल और 12-चैनल पिपेट का होता है, इसलिए 16 या अधिक चैनल का उत्पादन करने वाले पिपेट के कई निर्माता नहीं हैं, और केवल एक ही निर्माता है।

5 पिपेट ऑपरेशन टिप्स

पिपेट के संचालन में कुछ तरकीबें हैं। रेंज का चयन कैसे करें और पिपेटिंग के संचालन को कैसे नियंत्रित करें यह एक आम समस्या है जो नौसिखिए ऑपरेटरों को परेशान करती है। पिपेट के लिए मुख्य बिंदु निम्नलिखित हैं:

पिपेट टिप स्थापित करें:

पिपेट हैंडल के सबसे निचले सिरे पर टिप दर्ज करने के बाद, यदि टिप बॉक्स के अंदर काम कर रहा है, तो धीरे से दबाते हुए पिपेट को बाएं या दाएं हिलाएं या पिपेट को थोड़ा घुमाएं (केवल एक पिपेट को घुमाया जा सकता है) 1-2 सेकंड; यदि बल्क टिप का उपयोग कर रहे हैं, तो टिप को पिपेट की दिशा में धीरे से दबाते हुए 1-2 सेकंड के लिए धीरे से दबाएं। यदि यह ऑपरेशन वांछित सील प्राप्त नहीं करता है, तो टिप और पिपेट की जांच करना आवश्यक है।

प्रयोगशाला पिपेट चयन रेंज:

कुल मिलाकर, पिपेट की उपलब्ध रेंज पिपेट की अधिकतम रेंज का 10-100% है।
परिचालन अनुभव के आधार पर सबसे अच्छी सलाह यह है कि पिपेट की इष्टतम सीमा पिपेट की अधिकतम सीमा का 35-100% है।
पिपेट पिपेटिंग की दर को नियंत्रित करता है:

पिपेटिंग प्रक्रिया के दौरान, पिपेट को धीरे-धीरे अंगूठे के दबाव को कम करना चाहिए ताकि तरल टिप में समान रूप से और धीरे-धीरे बढ़े।
प्रयोगशाला पिपेट आकांक्षा की गहराई और कोण को नियंत्रित करता है:

(1) पिपेट टिप विसर्जन के लिए गहराई की आवश्यकताएँ:

आकांक्षा की गहराई ऐसी होनी चाहिए कि वांछित पिपेट मात्रा प्राप्त हो जाए;
पिपेट टिप की बाहरी दीवार को तरल के संपर्क में यथासंभव कम रखता है।

(2) पिपेट पिपेटिंग कोण: पिपेटिंग के दौरान पिपेट को ऊर्ध्वाधर अवस्था में रखना चाहिए।

पिपेट के रहने के समय के बारे में:

बड़े पैमाने पर पिपेटिंग (एमएल वर्ग) के लिए पिपेट और चिपचिपाहट पानी के नमूनों की पिपेटिंग की तुलना में काफी अधिक है, पिपेटिंग के दौरान अंगूठे को छोड़ने के बाद, टिप को हटाने से पहले 3-5 सेकंड के लिए तरल में रहने की अनुमति दी जानी चाहिए।

प्रयोगशाला पिपेट भंडारण:

पिपेट का उपयोग करने के बाद, पिपेट को अधिकतम सीमा तक समायोजित किया जाना चाहिए और फिर लटका दिया जाना चाहिए (एक समर्पित स्टैंड पर लटकाया जा सकता है या प्रयोगशाला बेंच के धातु क्रॉसबार से जोड़ा जा सकता है)। पिपेट के उपयोग में प्रवीणता के लिए उपरोक्त आवश्यकताओं में महारत हासिल होनी चाहिए।